G418遗传霉素，是一种氨基糖苷类抗生素，它通过影响 80s 核糖体功能而阻断蛋白质合成，在分子遗传试验中常被用作抗性筛选。它通过抑制转座子Tn601，Tn5 的基因对原核和真核等细胞产生毒素,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当 nco 基因被整合进真核细胞 DNA 后,则能启动 neo 基因编码的序列转录为mRNA，从而获得抗性产物的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G418 的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。

产品使用

在使用 G418 筛选抗性细胞之前，必须先确定抗生素在目的细胞中的最佳使用浓度。

操作方法:将细胞稀释到 1000个/m，在 100μg/ml~1000μg/ml的G418浓度范围内进行筛选，选择出在10~14天内使细胞全部死亡的最低G418浓度来进行下一步的筛选试验。

1 )细胞转染含neo基因的质粒，或感染含neo基因的慢病毒。24h(转染)或 48h(慢病毒感染)后,细胞继续培养于含一定浓度 G418的培养基中(注意细胞不要太密最好细胞密度不超过 25%);

2 )每3-4天换液，更换新的含 G418 的培养基;

3 )挑单克隆细胞到 35 mm 培养皿中，继续于含 G418 的培养基扩大培养

4 )扩大培养的带抗性的细胞可用于后续验证和细胞功能学实验

5 )注意事项

本产品仅用于研究和实验室用途，不适用于药物，家庭或其他用途。

请避免直接与皮肤接触，操作后请及时清洗双手。