Puromycin是来源于Streptomyces alboniger的一种氨基核苷类抗生素,中文名为嘌呤霉素,常用于筛选通过质粒转染/转化、病毒感染等方法能表达pac基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。Puromycin不仅用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。嘌呤霉素通过抑制蛋白质合成而抑制或杀死细胞。它具有与tRNA分子末端类似的结构,能够同氨基酸结合,代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合,并掺入到生长的肽链中,但不会参与随后的任何反应, 因而导致蛋白质合成的终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟的多肽。
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
单位 |
价格(元) |
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Ms-puro-001 |
Puromycin(10mg/ml) |
1ml |
支 |
500 |
稳定细胞株的筛选--嘌呤霉素
1、将待筛选细胞接种于 48 孔板中至 70-80%融合度
2、待细胞贴壁后,加入嘌呤霉素(0, 1, 2.5, 5, 10μg/ml)进行筛选。
3、得出药物处理 48h 后细胞全部死亡的最低药物浓度
4、将细胞种植在24 孔板中,贴壁后进行慢病毒感染,感染第二天,加入 puromycin药物筛选
5、筛选后的细胞即时观察荧光判断是否获得感染效率 100%的细胞
B、同时接种细胞于6孔板(10 cell/well)或6cm dish(10 cell/well), 接下来的步骤详见步骤 9
7、接种后第二天观察孔板,标记出具有单个细胞的孔